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MyoD1、Myogenin在儿童横纹肌肉瘤中的表达及其临床意义

发布时间:2014-02-22 12:20:38  

一1870一重庆医科大学学报2010年第35卷第12期fJoumalofChongqingMedicalUn.Ⅳemily2010.VoL35No.12J临床研究文章编号:0253—3626(2010)12—1870-04

MyoDl、Myogenin在儿童横纹肌肉瘤中的表达

及其临床意义

马玉虹,王珊,邓晓斌,李想

(重庆医科大学附属儿童医院肿瘤外科,重庆400014)

【摘要】目的:探讨MyoDl、Myogenin在儿童横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarmma。RMS)及其他3种儿童小细胞恶性肿瘤中的表达情况及其临床意义。方法:选取胚胎型横纹肌肉瘤(Embryonalrhabdomyosarcoma,ERMS)11例。腺泡型横纹肌肉瘤(Alveolarrhabdomyosareoma。ARMS)5例,神经母细胞瘤、恶性淋巴瘤、尤文肉瘤各10例,行HE染色,并应用s-P免疫组织化学染色法检测MyoDl、Myogcnin蛋自在这4种儿童小细胞恶性肿瘤中的表达水平。结果:MyoDI、Myogenin在RMS中阳性表达率分别为:75%,68.75%.在其他3种肿瘤中阳性表达率均为O%,MyoDl、Myogenin在RMS组中的表达与其他肿瘤组比较差异有统计学意义(尸锄.05),2种蛋自在ARMS中的阳性表达率明显高于ERMS(P<O.05),其恶性程度越高.MyoDl和Myogenin阳性表达越强(P<O.05oMyoDl、Myogenin在预后差组中的阳性表达率明礁高于预后中组(P<0.05o结论:MyoDl、Myogenin可以作为辅助鉴别RMS及其他小细胞恶性肿瘤的依据;MyoDI、Myogenin基因可以作为辅助诊断儿童RMS的综合指标.也可作为鉴别儿童ERMS和ARMS有用的分子生物学标志;检测儿童RMS中MyoDl、Myogenin的表达情况对RMS恶性程度及预后的判断有一定的临床指导意义。

【关键词】横纹肌肉瘤;儿童;MyoDl;Myogenin

【中国图书分类法分类号】R739;R729【文献标识码】A【收稿日期】2010-07—23

TheexpressionsandclinicalsignificanceofMyoDlandmyogeninin

rhabdomyosarcomasofchildhood

肘AyH—JIlong,etal

(DepatmentofSurgical

【Abstract】Objective:ToinvestigatetheOntology,舭Children’sHospital,ChongqingMedicalUniversity)rhabdomyosareoma(RMS)andothersmallcellmalignant

ofembryonalexpressionsofMyoDIandMyogcninintumorsofchildhood。80astuapproachtheirclinical

alveolarsignificance.Methods:llcasesrhabdomyosarcoma(ERMS)。5ca嘲ofrhabdomyosarcoma(ARMS).10ca蝼ofneumblastoma.10casesofmalignantlympho啪and10c部燃ofEwing’ss衄℃m媳wcl'e

werecollectedandstainedwithHEstaining。todetecttheexpressionlevelsofMyoDlandMyogeninproteinsbyS-Pimmunohistochemistrymethodinthese4typesofsmallcellmalignanttumors.兄∞铀妇:ThepositiveexpressionsofMyoDIandMyogenininRMS75%and

rates68。75%respectively.buttheexpressionratesintheother3

weretypesofsmallcellmalignanttumorsWCrsO%.ThepositiveexpressionandinknsityofMyoDlandMyogenininRMSgrouphigherthanthoseintheother3typesofsmall

werecellmalignanttumorssignificandy(pc0.05).Thepositiveexpressionratesofthese2prote.insinARMShigherthaninERMS(p(O.OS).ThehighermalignantlevelWaS.

obviousexpressiondifferencebetweenthehighertheposidvcexpressionsofMyoDlandmyogeninshowed(P<0.05).Thepositiveexpressiveratesofthese2typesofproteinsinbadprognosisgroupwerehigherthanthoseinmiddleprognosisgroup(f】I<-0.05).Cgmdusio,n:The

asMyoDlandMyogenininRMSandintheother3typesofsmsl]cellmalignanttumorsc棚beused

other8m/IllcellanindexthatdistinguishesRMSwithmalignanttumors.MyoDlandMyogeninc鲫be

toacombinationindexofauxiliarydiagnosisinRMS.providingsignificantandadditionalmolecularbiologicalmethodspathologicaldiagnosis.

[Keywords]Rlmbdomyosarmma;Child;MyoDI;Myogenin

横纹肌肉瘤(Rhabdomy删。RMs)是儿童期最常见

作者介绍:马玉虹(1985一)。女,硕士,的恶性软组织肿瘤111.约占儿童软组织肉瘤的45%一70%周.其5年生存力较低朔。RMS来源于横纹肌的问充质细胞,由几

研究方向:儿童实体肿薏。

通讯作者:王鼍。女,袭授。E-mail:wangshan778@163.com。

基金项目:重庆医科大学棱缓课题重点项目《蝙号:XBZD200708o乎不表现任何细胞分化证据的原始细胞组成.也可包含具有成熟骨骼肌特征的高度分化的细胞。其按照遗传及组织学分类为:胚胎型横纹肌肉瘤(Embryonslrhabdomyosarcoma,ERMS)。

万方数据

重庆医科大学学报2010年第35卷第12期(JournalofChongqingMedicalUnivemRy2010.V01.35No.12)一1871一

其中包括梭形细胞葡萄状变异型,腺泡型横纹肌肉瘤(Alve—

olar

为阴性;每张切片观察5个具有代表性的高倍视野(×400)。每个视野计数200个细胞,共1O(30个细胞.计数其中的染色阳性细胞数,根据阳性细胞所占比例分析:<25%为(一),25%一50%为(+).50%一75%为(++),>75%为(+++),(++)及其以上者为强阳性表达。

1.2.3统计学处理所有数据均在SPSSi7.0统计分析软件上进行。MyoDl、Myogenin相应各组的阳性表达强度及阳性表达率比较分别用等级资料秩和检验、Fisher精确概率检验法。P<0.05认为差异有统计学意义。

rhabdomyosarcoma,ARMS)和一种罕见的成体变异:多形

性横纹肌肉瘤(Pleomorphierhabdomyosarcoma,PRMS)t4;。RMS常表现为分化不良的小圆细胞.缺乏明显的横纹肌母细胞,在光镜下仅有40%的病例可找到横纹。从而雉以与其它儿童小细胞恶性肿瘤相鉴别.给病理组织学诊断带来很大困难。

从20世纪80年代以来。国内外对生肌调节因子的研究已日渐深入,至今,哺乳动物中发现的生肌调节因子(Myogenicregulatoryfactors.MRFs)有4个:MyoD、Myogenin、Mvfs及MRF4。早在1989年Serable已开始将检测MyoDl应用于诊断RMS。本实验使用S—P免疫组织化学染色法检测MyoD|、Myogenin蛋自在儿童RMS及其他儿童小细胞恶性肿瘤中的表达情况,并探讨其临床意义。

2结果

MyoDl、Myogenin阳性核染色分别见于12/16例(75%)和11/16例(68.75%)RMS(表1),RMS组中2种蛋白阳性表

I材料与方法

1.1材料

本实验46例临床标本均取自重庆医科大学附属儿童医院病理科2006~2009年间的石蜡标本。其中,RMS16例,神经母细胞瘤、恶性淋巴瘤、尤文肉瘤各lO例。在16例RMS中。ERMSll例。ARMS5例:按照组织学分级㈣:I级7例.Ⅱ级4例,Ⅲ级5侧;根据新IRS分类:预后中ll例。预后差5例。所有标本均取自术前未经过任何化疗的患儿。

1.2方法

l。2.I

达比较差异无统计学意义(p>o.05);其他3种小细胞恶性肿瘤的阳性表达率均为0%,IO例神经母细胞瘤和lO例恶性淋巴瘤中MyoDl和Myogenin蛋白不表达,lO例尤文肉瘤中2种蛋白呈极低水平表达或不表达。12例RMSMyoD!染色阳性包括7例ERMS和5例ARMS,1l例RMSMyogenin染色阳性包括6例ERMS和5例ARMS.MyoDl和Myogenin蛋白在ERMS中的阳性表达与ARMS组比较差异有统计学意义(P<0.05).2种蛋自在ARMS中的阳性表达率均明显高于ERMS(P<0.05)(表2

在16例RMS中.MyoDi、Myogenin蛋白在RMS中的表达水平与肿瘤的恶性程度成正相关(P<O.05),其恶性程度越高,MyoDl、Myogenin的阳性表达就越强(见表3o本实验结果显示MyoDl、Myogenin的表达与RMS预后有明湿的相关性:MyoDl和Myogenin在预后差组中的表达率要明显高于预后中组(P<O.05),其阳性表达率与预后呈明显的负相关(见表4)。

HE染色对标本切片进行病理复检及用s_P免疫组织

化学法检测病理标本切片中MyoDl、Myogenin的蛋白表达水平每例石蜡标本连续5p.m切片。HE染色进行病理复检。免疫组织化学染色:采用S-P免疫组织化学染色法嘲。鼠抗人MvoDl单克隆抗体(5.2F,稀释度1:300)、鼠抗人Myogenin单克隆抗体(F12B.稀释度l:500)购自Abeam香港公司,S—P免疫组化试剂盒购自北京康为世纪生物科技有限公司.操作严格按说明书进行,均采用pH6.0枸橼酸盐缓冲液加热修复法对组织抗原进行修复。实验以PBS代替第—抗体作为空白对照。1.2.2判断标准MyoD!。Myogenin阳性部位均定位于细胞核.其阳性反应表现为细胞核中出现棕黄色颗粒.不着色则

寰1

3讨论

在儿童肿瘤中,小细胞恶性肿瘤种类繁多.临床上单单凭借症状及体征难以鉴别。尤其是在光镜下RMS和其他的

2种蛋白在4类肿瘤中的阳性表达奉(%)

?为神经母细胞瘤组、恶惟淋【坚瘤组、尤文肉瘤组‘jRMS组比较。P<0.05;4为RMS组巾2种援内表达比较.p>O.05

裹2

2种蛋白在ERMS和ARMS中的阳性表达事(%)

。为MyoDI的阳性表达率与ARMS组比较。P<0.05;‘为Myogenin的阳性表达率与ARMSglt=匕较。P<O。05

万方数据

一1872一

重庆医科大学学报2010年第35卷第12期(JoumalofChongqingMedicalUniversity2010.V01.35No.12)

。为MyoDl、Myogenin表达与l级组比较,P<0.05;。为MyoDl、Myogenin表达与Ⅱ级组比较,P<O.05;。为MyoDl、Myogenin表达与nl级组比较,

p<o.05

表4

2种蛋自在RMS中的阳性表达与预后的关系(%)

。为MyoDI、Myogenin的表达预后中组与预后差组闯有屁著差异,P<0.05;6为Myogenin阳性表达与预后差组比较,P<0.05

AB

A.ERMS:疏松黏液或水肿背景中散在分布着中等量瘤细胞,瘤细胞较小;B.ARMS:相互交织、吻合的纤维结缔组织分隔瘤细胞形成腺泡状结构.附着于纤维间隔肿的瘤细胞较小.空腔或腺泡中的瘤细胞较大

图1

RMSHE染色Ix200)

ABCD

A.MyoDl蛋白在ERMS中的阳性表达:肿瘤细胞核呈强阳性棕黄色染色.阳性细胞成团分布;B.MyoDl蛋白在ARMS中的阳性表达:肿瘤细胞核呈强阳性棕黄色染色。阳性细胞呈弥漫性分布;C.Myogenin蛋自在ERMS中的阳性表达:肿瘤细胞核呈阳性棕黄色染色.阳性细胞呈散在分布;D.Myogenin蛋白在

ERMS中的阳性表达:肿瘤细胞核呈强阳性棕黄色染色.阳性细胞呈弥漫性分布圈2

MyoDI、Myogenin./ERMS中的阳性表达(S-P染色X200l

小细胞恶性肿瘤难以区分,给病理组织学诊断带来很大困难。而临床上不同种类肿瘤其治疗方案不同,因此,确定肿瘤的病理组织学诊断尤其重要。以往国内外已有许多使用各类方法检测肌源性分化标志物,如:肌红蛋白、波型蛋白、肌钙蛋白、肌纤蛋白、肌球蛋白、肌动蛋白等来辅助诊断儿童RMS.但这些蛋白的特异性及敏感性的不高.使得其对确定肿瘤组织的来源意义并不大.故需要借助其他特异性标志物来帮助诊断及鉴别诊断儿童RMS。

胚胎发育早期的生肌过程为:多能胚胎干细胞到中胚层干细胞.然后定向发育为成肌纤维,再分化成为肌管,最后融合形成肌细胞,即肌纤维。在定向阶段已有碱性螺旋一环一螺旋结构的生肌调节因子的表达.并指导定向,直到分化阶段,一旦生肌调节因子水平降低或撤出,成肌细胞的分裂、增殖即停止.因此,MRFs对骨骼肌系统的发育成熟具有重要意

义,其中MyoDl确定肌源性的发生,而Myogenin则是肌细胞终末分化的关键因素。在肿瘤中,早期实验指出MRFs在RMS中均有阳性表达,而在其他的软组织肿瘤中无表达。

根据MyoDl、Myogenin在儿童RMS与其他3种儿童小细胞恶性肿瘤中表达的明显差异可以推断:MyoDl和Myogenin可以作为辅助鉴别儿童RMS及其他小细胞恶性肿瘤的依据,为病理学诊断提供重要的分子生物学标记。本实验RMS组中.2种蛋白的阳性表达比较无显著差异(P>O.05)。Moroui

等n的研究结果则与本实验结果类似,面Wang等M的实验

结果不同。

Morgenstem等lml的研究结果显示Myogem在ARMS的平均阳性表达率明显高于ERMS.他们认为Myogenin可以用来区分ERMS和ARMS。本实验结果显示2种蛋白在2种

类型RMS中的阳性表达比较均有显著差异,因此,MyoDl、

万方数据

t庆医科大学学报2010年第弱卷第12期【JoumalofChongqingMedicalUnivemlty7.010.V01.3SNO.12)

一1873一

Myogenin可以作为辅助鉴另,JJL童ERMS和ARMS的有用的分子生物学标志。

RMS的病理组织学分级标准I≈:主要参考细胞分化的成熟程度、细胞的异形性、坏死及核分裂数等。分为3级:I级:肿瘤以梭型细胞及小细胞为主,有明显的横纹肌母细胞分化,核分裂相少见;II级:以小细胞成分为主.有一定量的梭型细胞及横纹肌母细胞分化,有一定异型性,按分裂相6—10个/lOHPF;m级:肿瘤几乎由一致性的小圆细胞或原始间叶样细述.2009,15(4):514.

【5】CostaJ。EdwardW.LannodG,etaI.Thegradingofsofttissue

ma:resultsof

BsroD--

clinieohistopathologiecorrelationin

aseriesof163

casc[J1.

Cancer.1984。53(3):530—541.

【6】RadsclliG,PatrunoM.MacgamzzoL,eta1.Expressionandcellular

localizationofinsulin-likegrowthfactor-ll

protein

andmRNAinSparus

aurataduringdevelopment[J】.JEndocrin01.2003,178(2):285-299.【71

MomttiRA,NicolKK,ParhamDM。eta1.Animmunohistochemical

to

algorithm

facilitatediagnosisandsubtypingofrhabdomyosareoma:the

胞构成,横纹肌母细胞少见。或有明显异型性,坏死明显.核分裂相多见>10个/10HPF。本实验发现MyoDl、Myogenin蛋白在RMS中的表达水平与肿瘤的恶性程度成正相关(p,0.05)。恶性程度越高,MyoDl、Myogenin的阳性表达就越强。国内外也有类似研究结果[11-141。决定RMS预后的主要因素包括肿瘤部位、病理分级和大小1151。我们发现,RMs中MyoDi、Myogenin的表达与RMS预后有明显的相关性:MyoDI和Myogenin在预后差组中的表达率要明显高于预后中组,其阳性表达率与预后呈明显的负相关。

总之.MyoDl、Myogenin可以作为辅助鉴别RMS及其他小细胞恶性肿瘤的依据;MyoDl、Myogenin基因可以作为辅助诊断儿童RMS的综合指标,也可作为鉴别儿童ERMS和ARMS的有用的分子生物学标志;检测儿童RMS中MyoDl、Myo-genin的表达情况对RMS恶性程度及预后的判断有一定的临床指导意义。因此.对于儿童RMS的诊断、鉴别诊断、恶性程度的判断和预后的评估,MyoDl和Myogenin是很有用的标志物。

参考文献

f11金彪.祝明洁.薛建平.等.横纹肌肉瘤的影像诊断和病理分析比较【J1.中国临床医学影像杂志,2006.17(10):594.

f21何乐健.王琳.孙宁,等-JL童横纹肌肉瘤的临床病理研究

们.中华病理学杂志,2004。33(3):225—228.

【3】SbeityS.AbellaA.AwandP。et|I.Temporalbonerhabdomyesareo-

ilminchildren[J].IntJPediatrmorhinolaryn901.2007.71(5):807—810.

【4】王朋朋。杨立业.横纹肌肉瘤的分子生物学研究进展IJJ.医学综

万方数据

oneologygroup

exponence[J].AmJSurgPath01.2006。30(8):

WangJ.TuxY.ShengW

Q.Sclermingrhabdomyosarcoma

dini-

andimmunohiatochemicalstudyoffivecsses[J].AmJClin

F,AlagSioR,ZanazzoG.eta1.Resultsofaprospectivemini-

realdisseminateddiseasestudyin

human

rhaMomyosareomausingthree

molecularmarkenlJi.C41ncEr.2006。106(8):1766-1775.

MorgensternDA.ReesH,SebireNJ。ela1.Rlmbdomyosareoma

subtypingbyimmunohistochendcal

assessment

ofmyogenin:tissue

array

and肥“ewoftheliterature[J],PatholOneoiRes.2008.14(3):233—

【ll】MermelsteinCS,MartinsER。PmtiltmDM.eta1.Associatiobe-

tween

themuscle-specificproteinsdesminandcaveolin-3

in

musclecells

Tissue,2007.327(2):343-35I.

【121马兴.王全平.王臻.等.肌原调节蛋白MyoDI在横纹肌肉

瘤中的表达【J1.细胞与分子免疫学杂志.1999。15(3):213-214.

【13】王正.陈建华.范钦和.横纹肌肉瘤中小窝蛋白一3的表达及鉴别诊断意义lJl.临床与实验病理学杂志.2008.24(2):203—206.

【14]FineSW,LizantiMP,Ar弘niP.eta1.傀vmlln-3is

sensitiveand

specificmlirkerfor

rlmbdomyosareonm[J].ApplImmunohistehemMolMop

pIIol。2005,13(3):231-236.【15】WenHR。BorysK.GuyL.et

a1.Combined¨础endothefial

goshfactorreceptor/epidermallocal.uterine.and眦tatie∞n

growthfactor

receptor

blockadewith

chemotherapyfortreatmentof

tissue捌I卜

eoma[J}.ClinCancerBes.2008.14(17):5466-5474.

(责任编辑:张学颖)

children’s962—968.

【8】8

eopathologiePath01.2008.129(3):410--415.

【9】Sartoridiffemnt

f10l

study238.

们.Cell

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