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石墨炉原子吸收光谱法测定儿童血铅含量

发布时间:2014-01-10 10:02:22  

海峡预防医学杂志%""’年第4卷第(期7IBJCIK+BLM=LH%""’NO2-4:O-()&

文章编号:()!""#$%#"&%""’"($"")&$"%

【实验研究】

石墨炉原子吸收光谱法测定儿童血铅含量

谢星云,徐为民,高忠,陈进国,唐文娟,陈建龙

(福建省劳动卫生职业病研究所,福州’)&"""!

摘要:[目的]建立儿童血铅测定的方法。[方法]微量采血,血样经*在%+乳化剂稀释后直接进样,,’-’./波长下用石墨炉原子吸收光谱法测定。[结果]方法的线性范围为"/,最低检出浓度为!/(进样%),精密度!!"""1-)("1""200

为%回收率为4[结论]此方法易被儿童和家长接受,适合儿童血铅测定和筛选。-’(3!,-!,3,%-"3!!"’-"3。

关键词:血铅;石墨炉原子吸收光谱法;儿童健康

中图分类号:;5))(-!!*(&#-’!

文献标识码:6

铅对儿童健康构成很大的威胁,由于环境污染和儿童用品

[]!含铅量过高,铅对婴幼儿及儿童的危害日益严重。石墨炉原

件和石墨管衰减等影响,我们对血铅测定条件的干燥、灰化、原子化等步骤的温度和时间进行了优化,升温程序见表!。在该条件下测定,标准曲线线性良好。回归方程#D"-""&($F

,相关系数%D。"-""!,"-444

表!

升温程序干燥干燥干燥灰化

!原子化

子吸收光谱法测定血铅其灵敏度和精确性较高,是世界公认的方法。为使测铅工作更易被儿童和家长接受,我们用7*185$获得满4%4型原子吸收分光光度计采末梢血测定儿童铅含量,

意的结果。!

材料与方法

石墨炉升温程序

温度(G)

,"!%")""(""!&""%’""

斜坡/保持时间()A

/""

/%&"/""/)!"/"#/"’

!-!仪器与试剂英国9:;<8=公司的7*185$4%4型原子

铅元吸收分光光度计,>?$4"石墨炉、?74"石墨炉自动进样器,

素空心阴极灯,热解石墨镀层管,振荡器等;硝酸(优级纯),铅标准液(/,购自国家钢铁材料测试中心冶金部钢铁研究!-"//20总院),基体改进剂用聚乙二醇辛基苯基醚(*,去离子+乳化剂)水。试验中所用器材均用!,去离子水冲净"3的硝酸浸泡%)@晾干备用。!-%方法!-%-!采样

儿童无名指指端先后用肥皂水、去离子水和酒

净化

!原子化时停气。

、/%-%方法的准确度将’份血样分别加入%")"和,""10

的铅标准溶液进行测定,回收率在4结果%-"3!!"’-"3之间,见表%。

表%

样品编号

!!!%%%’’’

本底值&’-%&’-%&’-%,%-’,%-’,%-’!’!-(!’!-(!’!-(

精棉球擦洗干净后,用微量取液器抽取血样),置"""2-’%/2立即混匀振荡’,然后加入!*+乳化剂的离心管中,"A3硝酸

,混匀,冰瓶保存待用。)""2!-%-%

仪器工作条件

波长%灯电流)狭缝,’-’./,-&/8,

进样量%,氘灯扣背景,峰高测定,保护气为超纯氩!-"//,""2气(8)/,。石墨炉B%&"/2/C."-!/2*+乳化剂定容到!""/2升温程序为’步干燥,斜坡升温。

[]

(/)用!!-%-’标准曲线的制备%取标准液!-"//23硝酸0

逐级稀释成!/然后用"2D!""-!3*+乳化剂0铅的中间液,

血铅回收率测定结果(!/)$#

加标量%")","%")","%")","

加标测定值

(#-’,#-(!’)-&!"&-)!!4-,!&&-,!))-"!(!-’%!(-&

回收率(3)

4%-"4)-"!"!-"!"’-"4,-"4(-"4&-"4)-"!"%-’

溶液稀释成!/,,2D"-%"!"0的标准应用液。取铅应用液",,,,分别加",,,%")","!("和%"""2-!3*+乳化剂’%"’!"’""

,,,再分别加正常人血),各加!%,"%)"!("和!%""2""23硝酸,摇匀。制得含量为",,,,,/)""2&!"%")","和!"""1的铅标0准系列。在上述条件下测定吸光度,自动绘制标准曲线。依!-%-)测定与计算将离心管的血样倒入!/2的样品杯,号码顺序置于样品盘上,按制备标准曲线相同条件进行测定,同时测定试剂空白。按公式!D"E!"计算铅浓度。式中,!为样品中铅浓度("/),1"为减去空白值后的血铅含量。0"%-!

结果与讨论

石墨炉测定条件的选择

由于不同的仪器性能,环境条

、/%-’方法精密度按标准曲线制备浓度为!")"和,""10

的样品进行(次测定,均在允许范围!&值为%-’(3!,-!,3,之内(表’)。

灵敏度和检测限按测定步骤和条件,本%-)方法线性范围、法线性范围为"!!/,灵敏度为"/,最低检出浓"""1-##"100度为!/。-)("10

%-&样品保存时间对测定结果的影响取(份样品在)G下保存!、、、、与当天测定结果比较,样品在’&#!)H后分别测定,第#天是稳定的(表))。

+&

表!

血铅浓度#$+$)$

海峡预防医学杂志’$$!年第*卷第&期CHLTFH32L<U5<-’$$!8VK%*:V%&

血铅精密度测定结果(!/)"!

测定值,,#$%!#$%&##%’

,,*%)*%()%*,,’%!+#%*+#%#+,,+!%#++%’!*%!,,)%!,*%+)$%(,,,平均值#$%$(+#%*))$%*’

标准差!(")"值$%)’’#%&))#%*#

)%#)+%$’’%!&

’%&方法的应用应用本法对有临床症状的,’例$!#+岁

/,儿童进行测定,有++例血铅水平小于#$$"0’)例血铅水平/

大于#/,其中#/,属中度铅中$$"0$例血铅在’$$!+($"0//毒。

小结:

表+

当天#

!(,样品保存时间对测定结果的影响(!/)"!

测定值(#.)&

#!+%’

#!$%)#’)%+#’&%)#’(%’(")!"值

’%(&+%+#(%&,&%*!保存时间()-

参考文献:

[]杨建平%儿童铅中毒诊断、治疗和预防[],#3%山西妇幼卫生,’$$#

():#’++4&%[]线引林%生物材料中有毒物质分析方法手册[5]人民卫生’%北京:出版社,#**+%*&4**%

收稿日期:;修回日期:’$$!4$&4#$’$$!4$*4’&

文章编号:()#$$,4’,$(’$$!$&4$$+&4$’

【实验研究】

乙型肝炎患者血清67849:;与67<;/的关系

张联娜,毛旭升(福建省级机关医院,福州!)($$$!

摘要:[目的]探讨乙型肝炎患者血液中6[方法]用荧光定量聚合酶链反应78病毒含量与血清67<;/之间的关系。(=检测乙肝病人血清中的6用A(6)。[结果]6>42?@)7849:;含量,0BC;法检测血清中乙肝标志物<抗原7<;7<;//阳性组其6且含量明显高于6($!),7849:;检出率#$$",7<;$%$#67<;7849:;阳性检出率为/阴性组/阴性组中6[结论]用=准确地反映乙肝患者体内病毒复+*%,"。检验结果能有效反应乙肝的临床治疗和监测发现。>42?@能直接,

制水平。对乙肝诊断、指导临床用药和治疗监测方面具有实用价值。

关键词:乙型肝炎;乙肝病毒脱氧核糖核酸;乙肝<抗原;荧光定量2?@法;A0BC;酶标法

中图分类号:@(#’%&$+

文献标识码:7

乙肝病毒血清标志物检测是目前诊断乙型肝炎病毒(6免疫反应状态的检测手段,而病毒定量检测678)7849:;是衡量678感染复制水平的有价值的检测手段。为了探讨乙肝患者血液中病毒含量与血清6我们用荧光7<;/之间的关系,定量2(=检测’?@>42?@)!+例乙肝患者血清67849:;含量,以明确病毒复制水平与乙肝病毒标志物的相互关系,以期为乙肝的临床诊断和治疗提供实验依据。#

对象与方法

#%!$

统计学处理结果

组间差异性比较采用%检验。

67<;7849:;#$$"阳性;67<;784/阳性组6/阴性组6

*%,"。血清67849:;含量与67<;9:;阳性率+/关系见表

,可见血清6#7<;7849:;含量高于67<;/阳性组中的6/阴性组。

表#

组别(P)67<;/

(R)67<;/

血清%(-/)的关系&’(&)*+,(.0’123!与%/

例数),#+,

阳性数(")6(对数值)$值7849:;()),#$$

(),!+*%,

,%&(Q#%!,+%+!Q#%)!

!$%$#

#%#临床资料’!+例病人为我院’$$’年&!#’月的门诊病

人。男#女&年龄#平均!&,例,,例,+!((岁,(岁。其中(“大三阳”)(“小三阳”)67<;),例,67<;#+,/阳性组/阴性组例。收集病人血清置4’$D保存待测。#%’检测方法67849:;定量检测采用深圳匹基生物工程公司提供的荧光定量2?@检测试剂盒。样品经2AE沉淀提取后,加入事先配好的2置罗氏0?@反应液中,FGHIIK<L2?@仪/J中自动检测。扩增条件为*,然后按*!D预变性#MFN!D!$、仪器自动读取样品6O((D&$O共做+$个循环,7849:;含量。6试剂购自厦门英科新创78血清标志物采用酶标法测定,科技有限公司,按试剂盒说明书严格进行操作和判断结果。

注:67849:;呈阴性结果则不参与统计。

4

讨论

随着分子生物学技术的发展,病毒感染的临床诊断技术已

经从定性检测发展到定量检测。因常规2?@不能进行病毒基因的绝对定量,应用受到一定的限制。STIMTN方法的=>42?@是在普通2?@扩增系统中加入一个与靶基因序列特异互补的双荧标记探针,探针(’端标记荧光发射基团&羧基荧光素4(=,’端标记荧光淬灭基团&羧基四甲基碱性蕊香红TM)!4

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