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禽病学实验报告

发布时间:2013-12-22 14:43:03  

实验报告

实验项目名称: 禽病学综合实习

所属课程名称: 禽病学实验

1 实验目的

1.1 熟悉对禽的病理解剖

1.2 掌握对病变的观察

1.3 鸡胚的病毒液接种

1.4掌握HA和HI试验操作过程和技术

1.5了解规模化鸡场的布置及日常饲养规划

2 实验材料与方法

2.1 实验材料

鸡 ,血清,96孔板,手术刀,手术剪,镊子,酒精棉,鸡胚,病毒,微量移液器(配有滴头),阿氏液、1%鸡红细胞悬液, PH7.2\0.01mol/L PBS.

2.2 实验方法

1、鸡的人工发病试验

21日龄三黄鸡14只,每只鸡肌肉注射0.5mL未知病原悬液(约100EID50),每天上午9:00、下午5:00各观察一次,记录鸡的采食情况、精神状况、有无发病症状、有无死亡。如有死亡,对死亡鸡进行剖检,采肝脏、脾脏等病料,将病料暂存于-20°C冰箱中。

2、 家禽解剖

(1)放血、宰杀后,用消毒药进行浸泡。

(2)腿内侧剪开,用力将股骨外翻,将鸡平放在解剖托盘内。

(3)腹腔,肝脏出血肿胀,肠道出血,胰腺、肾脏、法氏囊、盲肠扁桃体等有无病变或异常,剪开腺胃和肌胃,观察腺胃乳头和肌胃角质膜下无出血。将龙骨突用力上翻,观察肺脏、支气管等,外观没有病变,沿食道、气管剪开,发现气管内有大量出血点。

1

3 实验原诊断

(1) 接种物准备

(1.1) 将肺脏、脾脏、肾脏、肝脏、心脏、支气管等脏器物小许,放入灭菌钵中。加入少许石英砂,进行研磨,边研磨边加入PBS进行稀释。

(1.2) 抽取组织液装入离心管3000r/min,离心5分钟。

(1.3) 用注射器抽取离心上清液,装上细菌过滤器,将组织液过滤到灭菌离心管中。

(2) 胚蛋接种

(2.1) 将胚蛋在经照蛋器照蛋,避开气室和血管,用铅笔进行标注。

(2.2) 打孔。

(2.3) 每个鸡胚接种0.2mL 组织液。

(2.4)用蜡烛进行封口。存放2天。

4、血凝(HA)试验

(1) 在微量反应板的1孔~12孔均加入0.025mlPBS,换滴头。

(2) 吸取0.025ml病毒悬液加入第1孔,混匀。

(3) 从第1孔吸取0.025ml病毒液加入第2孔,混匀后吸取0.025ml病毒液加入第3孔,如此进行对倍稀释至第11孔,从第11孔吸取0.025ml弃之,换滴头。

(4) 每孔加入0.025ml体积分数为1%鸡红细胞悬液(将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入)

(5) 震荡混匀,在室温(20℃~25℃)下静置40min后观察结果(如果温度太高,可置4℃环境下),对照孔红细胞将呈明显的钮扣状沉到孔底。

4.1 结果判定

将板倾斜,观察红细胞有无呈泪滴状流淌,完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数代表一个血凝单位(HAU).

3 实验结果

3.1观察可知病鸡精神沉郁,鼻有分泌液,常甩头,无下痢,无死亡。

3.3两天后打开鸡胚气室和尿囊膜,胚内液体清亮。

3.4

2

从结果可以看出,该病毒的不能血凝。通过血凝试验和血凝抑制试验的血凝价等因素可以判定该鸡感染的病毒没有血凝效应,怀疑传染性支气管炎。

5 实验体会或小结

老师在给我们说关于鸡场的布置的时候,我有想以后是否要从事这方面的工作,并且还想到了以后要是我来布置会布置怎样的鸡场,要养什么品种的鸡,怎样才能预防一些疾病的发生。在做禽病的实验中,我的动手能力加强了,了解了血凝实验和血凝抑制实验的原理,更深的了解了关于实际鸡场的知识,使理论化的知识变得实际。其实我们好有很多不知道的东西,但是学习需要有一种不满足感,这样才能持续保持渴求知识的欲望。我想,在今后的专业学习中,我也一定会严格要求自己,约束自己,鼓励自己,认真学习专业知识,掌握专业技能,进一步充实完善自己。动物医学是一门对专业基础知识和实践操作能力有很高要求的专业,在进行每一次实验课之前,我们都要预习实验,初步了解实验的基本要求,基本原理,基本过程避免盲目进行实验,模仿别人实验,不注重实验过程,草草了事等弊病;在自己进行实验前,要认真听从老师的讲解,安排,认真学习老师的实验操作,遇到不懂得地方要及时的向老师提出疑问。

指导老师评语及成绩:

成绩: 指导老师签名: 3

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