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动物细胞培养

发布时间:2014-01-25 15:03:36  

思考与探究:
怎样才能获得大量自体皮肤,为 烧伤病人植皮呢?
在治疗烧伤病人时,通 常情况下是取烧伤病人健康 的皮肤进行自体移植。但对 一个大面积烧伤的病人来说, 自体健康皮肤有限,使用他 人皮肤会产生排异反应。

第二章 细胞工程

细胞工程
应用细胞生物学和分子生物学的方法,通 过某种工程学手段,在细胞水平或细胞器水平

上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质
或获得细胞产品的一门综合性科学技术。根据

操作对象的不同,可分为植物细胞工程和动物
细胞工程两大领域。

? 细胞培养是细胞工程中最基 础的技术

动物细胞培养
概念:
细胞培养是细胞工程中最 基础 的技术。 它是把机体的某一 组织或器官 取出,分 散成 ,使其在人工培养条件 单个细胞 下继续生存、生长甚至 增殖 的过程。

动物细胞培养的过程:
阅读课本观察 图片,简述动 物细胞培养的 基本过程

讨论:
1、动物细胞培养的原理是什么? 2、从动物机体中要取出哪些相关组织?并 解释原因。

3、组织分散成单个细胞的方法是什么? 其理论依据是什么? 4、动物细胞体外培养需要满足哪些条件?

动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官
剪碎

动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质,将细胞 网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。
遗传物质 未改变

单个细胞

胰蛋白酶 (分解弹性纤维) 加培养液

细胞悬浮液 10代细胞

原 代 培 养
传 代 培 养

细胞株

50代细胞
遗传物质 已改变

细胞系 无限传代

2、过程

动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞 细胞 制成 悬浮 物的组织、器官 剪碎 液 细胞系 原 细 细胞株 部分细胞“癌变”, 代
遗传物质改变,无 限传代

加培养液

培 养

胞 贴 壁

细胞 动物细胞培养不能 最终培养成动物体

50代细胞

剥离、分瓶

10代 细胞

传代培养

动物细胞生长特性
细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上, 称为细胞贴壁。 要求: 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易 于贴附。 细胞的接触抑制: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时, 细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的 接触抑制。

原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原 代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的 细胞称为原代细胞培养。 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制 成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培 养瓶中继续培养,称为传代培养。

细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞 生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存 活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。 细胞系:细胞株传

代至50代后又出现细胞 生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的 改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这 种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别: 细胞系的遗传 物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制, 容易传代培养。

巩固(一)
(1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长 到细胞表面 时,细胞会停止分裂增殖, 这种现象称为细胞的 。要使贴壁细胞 从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶 是 。 (2)随细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停 止,进而出现 的现象;但极少数细胞 可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生 改变面变成 细胞,该种细胞的黏着 性 ,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的 量 。

结合必修三《稳态与环境》所学 知识,阅读P22探究活动,想想 要想动物细胞培养必须满足的内 环境稳态的条件有哪些呢?

1、无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液) 2、营养物质 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸、动物血
清等。)

补充合成培养 3、温度和PH 中缺乏的物 36.5 +0.5度 ;PH为7.2-7.4。 细胞呼吸 4、气体环境: 维持PH O2和CO2(95%空气和5% CO2 )

巩固(二)
(3)在细胞培养过程中,通常在 条件 下保存细胞。因为在这种条件下,细胞 中 的活性降低,细胞 的速 率降低。 (4)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织 后,发生了排斥现象,这是因为机体把 移植的皮肤组织当作 进行攻击。

(1)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干扰 素、单克隆抗体等。
(2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。 (3)用于检测有毒物质

(4)用于生理、病理、药理等方面的研究, 为治疗和预防疾病提供理论依据

课堂检测
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞( A ) A.细胞系 B.细胞株 C.原代细胞 D.传代细胞
2、动物细胞工程技术的基础是 ----- ( D ) A.动物细胞融合 C.胚胎移植 B.单克隆抗体 D.动物细胞培养

3.为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的 细胞悬浮液,选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理( ) B A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.盐酸 D.胰脂肪酶 4.用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的 幼龄动物的器官或组织,其主要原因是这样的组织细胞 ( D ) A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强

5、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此图回答

(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取 幼龄动物的器官或组织、动物胚胎 自___________ 。 (2)容器A中的动物器官或组织

首先要进行的处理 剪碎 是__________ ,然后用 胰蛋白 酶处理,这是为了 使细胞分散开来。这样做的目的是 _______________. 使每个细胞能与培养液接触 (3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 _______ ___等。在此瓶中培 养一段时间后,一般传到第 10 代,有许多细 原代培养 胞衰老死亡,到这时的培养称为___________. 胰蛋白酶 (4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用_____ 细胞悬浮液 ,再分装。 处理,然后配置成___________ (5)在C瓶中正常培养了一段时间后,发现细胞全 细胞没有发生瘤变 部死亡。原因是_________________________ 。


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